Orvosi Hetilap, 1958. szeptember (99. évfolyam, 36-39. szám)
1958-09-21 / 38. szám - EREDETI KÖZLEMÉNYEK - Halász Tamás - Halászné Tauszk Éva - Szemere Pál: Serum glutamin-oxalecetsav-transaminase activitás meghatározása és klinikai jelentősége
ORVOSI HETILAP 1958. 38. A glutamin-oxalecetsav-transaminase specifikus enzym. Több-kevesebb mennyiségben minden szövetben megtalálható. Straub szerint azok az aminosavak, amelyek a szervezetben képződnek, aminocsoportjukat a transaminase (aminopherase) enzym révén, transaminálás útján nyerik. Transaminálásnak azt a folyamatot nevezik, amikor egy ketosav és egy aminosav a keto-, illetve aminocsoportját egymással kicseréli. Ezt a folyamatot a transaminase katalizálja. Braunstein mutatott ki először alanin+ketoglutarsav-pyroszőlősav+glutaminsav; alanin+oxalecetsav—pyroszőlősav+asparaginsav reactiókat a legkülönbözőbb szövetekben. A ferment, mely mint említettük, minden szövetben megtalálható, minden esetben egyensúlyi állapotot hoz létre, ami azt jelenti, hogyha csak egy aminosav is rendelkezésre áll, abból a többi aminosav felépítése is biztosított, amit Straub az enzym feladatának tart. Prostheticus csoportja a B0 vitamin (pyridoxin) aldehyd alakja, a pyridoxal, illetve ennek phosphatestere (Snell). Ezen katalizáló protein enzymnek a legnagyobb szöveti concentratiója és activitása a felsorolás sorrendjében, a következő szervekben van Cohen és Helthius szerint: szívizom, vázizom, agy, máj, vese, herék, tüdő, lép, pancreas stb. A serum glutamin-oxalecetsav-transaminase (LGOT) a következő reversibilis keto és aminosav transaminálást végzi: 1(4) glutaminsav+oxalecetsav SGOT a ketoglutarsav+1(2) asparaginsav. A SGOT, mint specificus enzym, az asparaginsavaminocsoportjának az a ketoglutarsavra való átvitelére hat és egy új aminosav synthesisét eredményezi; mégpedig glutaminsav és egy újketosav, az oxalecetsav, áll elő. (I. egyenlet.) A transaminase activitás meghatározása általában kettős enzym rendszer segítségével, spectrophotometriás úton történik. A serumihoz asparaginsavat és ketoglutarsavat adnak, a transaminase hatására keletkezett oxalecetsav almasavdehydrogenase jelenlétében oxidálja a DPNH-t (diphosphopyridinnucleotida) DPN- né. (II. egyenlet.) COOH I ch2 Ico COOH I -1-DPNH almasav-dehydrogenaseCH 2 CHOH + DPN COOH oxalecetsav COOH almasav A fenti eljárás Karmen módszere. A Beckmann-féle spectrophotometerre leírt LGOT activitás meghatározása a rendkívül hosszú és bonyolult módon előállítható a masavdehydrogena.se hiányában, klinikai vizsgálati módszernek nem volt megfelelő számunkra. Papírchromatographiás eljárása pedig, nehéz volta miatt, nem alkalmas rutin vizsgálatokra. Tekintettel arra, hogy a klinikus számára a SGOT activitás meghatározása diagnostikus szempontból nagy jelentőségű, sokan egyszerűsített és gyors colorimetriás módszereket közöltek. Mi legmegfelelőbbnek Th. Sail és munkatársai módszerét találtuk. Sail átdolgozta és serumra alkalmazta Tonházy, White és Umbrell szövetekben leírt LGOT activitás meghatározását. A próba a már fent leírt transaminálási reaction alapszik (I. egyenlet) de DPNH helyett az oxalecetsav anilinoitrattal pyroszőlősavvá való átalakítását használja fel (III. egyenlet). COOH I CH, CO I C0 anilhcitrat —*■ COOH + CO2 COOH oxalecetsav pyroszőlősav A keletkezett pyroszőlősavat úgy határozza meg, hogy 2—4 dinitrophenylhydrazinnal pyroszőlősav-phenylhydrazint hoz létre, ahogy ezt Friedmann és Haugen leírta. Az így létrejött pyroszőlősav só színét elektromos photométeren mérte. Vizsgálatainkhoz 48 óránál nem régibb, feldolgozásáig jégszekrényben tartott, savat használtunk fel. Az irodalmi adatok szerint 0—5 C°-n tartva, a serum kétheti állás után sem mutat jelentős LGOT activitás csökkenést. Sem izommunka, sem gyulladásos folyamatok nem emelik meg a SGOT activitást. March és Greenberg szerint a 2—4 dinitrophenylhydrazinnal történő meghatározások nem eléssé érzékenyek, mert a színt a ketosavak zavarják. Mi nagy klinika: beteganyagon végeztünk LGOT activitás meghatározást. Ketozist egyetlen esetben sem találtunk és ezen eljárást klinikai célra, rutin vizsgálatnak alkalmasnak tartjuk. aspara£insav COOH CHNHI COOH COOH a ketoglutarsav glutaminsav oxalecetsav EREDETI KÖZLEMÉNYEK A Budapesti Orvostudományi Egyetem II. sz. Belklinikájának közleménye. Serum glutamin-oxalecetsav-transaminase activitás meghatározása és klinikai jelentősége Írta : H ALAS Z T A M AS dr., H A L ASZ N E TRUSZK ÉVA dr. és SZEM ERE PAL dr. CHA COOH ch2 dinh3 COOH COOH COOH COOH ch2 ch2 ch2 spl transaminase ch2 clorillO