Orvosi Hetilap, 1985. április (126. évfolyam, 14-17. szám)

1985-04-07 / 14. szám - Lukács László - Bárdosi László - Somos Zsuzsa - Kocsis Béla: Néhány immunparaméter változása malignus bőrmelanómában szenvedő betegeken

óra múlva. Értékelés: pozitív a tesztkorong átmérőjé­nek (2 cm) legalább felét meghaladó induráció, erythe­ma vagy vesiculatio esetén (-­------1—1—[-). c) Specifikus teszt-antigénre (nyers tumor-antigén) Allogén primér tumorból és nyirokáttétből zsilet­tel kimetszett, 0,5 ccm volumenű tumorszövetet apróra darabolás után fémhálón átnyomkodtunk, majd homo­­genizátorban finom szövetpéppé roncsoltunk. A pépet 10 ml fiziológiás konyhasóoldatban reszuszpendáltuk, majd —20 °C-ra 3x lefagyasztottuk, ill. szobahőmérsék­leten felengedtük. A preparátum tárolása —20 fokon történt. Teszteléshez a szobahőn felengedett szuszpen­zióból 0,1 ml-nyit fecskendeztünk be i. e. Leolvasás 24 óra múlva. Pozitív: 10 mm-nél nagyobb átmérőjű induráció és/vagy erythema. 2. Abszolút lymphocyta-szám meghatározása (TLC,total lymphocyte count) n=60. A fehérvérsejtszám és a vérkenetből leolvasott % Ly alapján kalkuláltuk: Fosx%Ly TLC =---------------100 3. T-lymphocyták mennyiségi meghatározása 1 pl vérmintára vonatkoztatva (n=6) A lymphocyta-szeparálást Boyum módszerével vé­geztük centrifugálással, Ficoll-gradiensen (7). A birka vvt-kel spontán rozettát képző aktív T-lymphocyták számát Wybran, Carr és Fudenberg (32) módszerével, a keringő thymusdependens lymphocyták egészét meg­közelítően tükröző, ún. inkubált T-lymphocyták számát pedig Jondal és mtsai módszerével (12) határoztuk meg. B) Humorális immunvédekezés vizsgálata 1. Az ún. „természetes” ellenanyagok szérumt­ze­­rének meghatározása Backhausz módszerével (5) n=113 A titráláshoz indirekt haemagglutinatiós módszert alkalmaztunk 10 tagból álló bakteriális antigén-panel­lel. Boivin (6, cit. 5) módszerével a friss baktérium­tenyészetekből (Salmonella typhi 9, 12; Shigella la, 2b és 3 törzsek szomatikus 0-antigénjeit, a Sh. Sonner I. önálló serotypus 0-antigénjét, továbbá a Coli­dyspep­siae néhány gyakori serotypusát: 026, 055, 086, 0111 használva antigénként) phenolos extractióval tömény antigénkivonatot készítettünk, melyet 5%-os birka vvt­­szuszpenzióval inkubáltunk 30 percig 37°-on, majd az így modifikált birka vvt-ket a vizsgált savak 10-es léptékű hígításaival hoztuk össze. A legmagasabb, még indirekt haemagglutinatiót adó hígítást ii tér­ként jelöl­tük meg, és immunogrammokon ábrázoltuk. A vizs­gálat azon a korábban bizonyított tényen alapul (5), hogy a felnőtt populációban fenti antigénekkel szem­ben 80, vagy ennél magasabb százalékban antitestek detektálhatók, továbbá ezen antitestek immunglobulin­alosztályba tartozása is tisztázott (5). 2. A szérum immunglobulin és C3 komplement tartalmának mennyiségi meghatározása radiá­lis immundiffúziós módszerrel (22) n=34 Standardként Behringwerke készítményt alkal­maztunk (Human Standard Serum, stabilisiert: AG. Marburg/Lahn). Immunsavak: Humán, Bp.; ill. Levac, CSSR. 3. B-lymphocyták mennyiségi meghatározása EAC-rozetta-technikával Jondal és mtsai szerint (12) n=60 3. táblázat Lymphocyte vizsgálatok melanomás betegeinknél TLC : Total lymphocyte count; RI: rosette inhibition rate *: A különbség a kontrollértékhez képest szignifikáns, a­z esetszám A 3. táblázatban szereplő RI - érték azt fejezi ki, hogy az egészséges donorból szeparált lymphocyták EA-rozetta képződése milyen mértékben gátolt melanómás beteg széruma jelenlétében, az egészséges kontroll-egyén szérumát tartalmazó rendszerhez /%EA vizsgál képest. Az így kapott százaléklábat 1%£A kontr­a x 100 az optimálisnak vett 100%-hoz viszonyítjuk, azaz abból kivonjuk. Ha tehát mind a vizsgált szérummal, mind a kontroll szérummal történő inkubálás után a rozetta-szám azonos — azaz gátlás­a nem figyelhető meg — az RI%-os értéke 100— x 100, azaz zero. R Vizsgált betegcsoportok Takt.//d (%) Tink./^l (%) В—ly./jul (EAC-rozetta) (%) TLC/stíl (Abszolút ly szám) R/% (EA-rozetta gátlás) 695 + 78 816 + 103 190 + 26 Kontroll csop. (46 + 2,75%) (67 + 3,75%) (12,4 + 1,6%) 1497 + 127 2,6 ± 0,7 n = 18 n = 18 n = 18 n = 18 n = 16 569 + 94 729 + 142 288 + 45 I. Klinikai stádium (41,6 + 1,86%) (54,3 + 3,54%) (18,7 + 2,08%) 1576 + 227 4,4+ 0,1 n = 12 n =12 *n = 12 n = 12 n = 8 P =0,1 p =0,2 p =0,05 p ·0,2 p=0,1 II. Klinikai stádiumX491 X736­­X 237 1178 X6,5 n = 2 n = 2 n = 2 n = 2 n = 2 III. Klinikai 361 656 653 + 91 64 + 12 1345 + 150 39,2 + 4,9 stádium (27,2 + 3,17%) (48,5 + 3,85%) (4,7 + 0,54%) n = 17 n = 17 †n = 17 n = 17 *n = 17 p·0,01 p·0,1 p =0,005 p ·0,2 *p ·0,001 446 + 94 627 +124 71+14 1205+178 44,1 ±7,0 IV. Klinikai (39,3 + 5,35%) (56,5+5,07%) (6,5±2,9%) stádium *n = 17 n = 17 *n = 17 n = 17 *n= 9 p <0,05 О V a p<0,01 О Va p-< 0,001 859+119 1087+144 201 ±39 1728 + 323 Tartósan (50,8 + 2,63%) (63,9 + 3,28%) (12 + 1,8%) 4,2 <J1,3 tünetmentes n = 12 n = 12 n = 12 n = 12 n = 9 P<0,1 P<0,1 p<0,2 CN Ö Va P<0,1 821

Next